酶法生物样本H₂O₂含量检测试剂盒

发布日期：2025-02-10 10:36 浏览次数： 359 作者：admin

1 目的
       四氯化钛法是生物样本H₂O₂含量的经典检测方法。基于四氯化钛法，我司研发了2款H₂O₂含量检测试剂盒：（1）酶标仪，货号H₂O₂-1-Y，规格100管/96样，售价350元/盒；（2）分光光度计，货号H₂O₂-2-Y，规格50管/48样，售价180元/盒。
       据试剂盒用户和我司代测人员反映，四氯化钛法试剂盒存在如下缺点：（1）含丙酮、浓盐酸和氨水等，因此有刺激性气味；（2）提取液为丙酮，因此样本粗提液不能用于酶活性测定。
2 研发过程
       考虑研发酶法生物样本H₂O₂含量检测试剂盒：（1）改用缓冲液作为生物样本H₂O₂的提取液，从而样本粗提液也能够用于酶活性测定；（2）改用酶法检测粗提液中H₂O₂含量，不再使用丙酮、浓盐酸和氨水等，从而避免刺激性气味。
2.1 标准曲线
       制作四氯化钛法和酶法的H₂O₂标准曲线。回归方程分别为：（1）四氯化钛法，y=0.3052x+0.0019，R²=0.9997；（2）酶法，y=0.4888x+0.0007，R²=0.9993。决定系数（R²）是四氯化钛法略高，但是都符合要求；灵敏度则是酶法高于四氯化钛法。
2.2 生物样本测定
       与丙酮提取不同，缓冲液提取的生物样本粗提液中存在各种酶类，尤其是不需要其它底物的过氧化氢酶，可能造成H₂O₂含量测定值偏低。我们使用四氯化钛法和酶法实际测定了生物样本：（1）马铃薯块茎H₂O₂含量测定值，四氯化钛法为2.0087±0.0646 μmol/g鲜重，cv3.22%，酶法为2.2270±0.0568 μmol/g鲜重，cv2.55%；（2）小麦叶片H₂O₂含量测定值，四氯化钛法为7.8026±0.4269 μmol/g鲜重， cv5.47%，酶法为8.3476±0.4685 μmol/g鲜重，cv5.61%。可见，马铃薯块茎和小麦叶片的H₂O₂含量实际测定值都是酶法高于四氯化钛法，从而解除酶法测定值偏低的担忧。
2.3 酶法生物样本H₂O₂含量检测试剂盒研发
       在上述工作的基础上，我们进一步对提取液、测定体系、步骤和反应条件进行了优化，成功研发了酶法生物样本H₂O₂含量检测试剂盒。
3 建议
3.1 节省样本用量
       与四氯化钛法相比，酶法可以节省样本用量，同一份粗提液不仅可以用于H₂O₂含量的测定，还可以用于酶活性的测定。因此，如果您的样本量少，尤其是珍稀样本，建议您选择酶法生物样本H₂O₂含量检测试剂盒。
3.2 减少样本称量和提取的次数
       同一份粗提液可以用于H₂O₂含量和酶活性检测。因此，如果您想减少样本称量和提取的次数，从而减轻测定工作量，建议您择酶法生物样本H₂O₂含量检测试剂盒。
3.3 避免刺激性气味
       四氯化钛法的刺激性气味不仅影响测定体验，而且危害身体健康。因此，如果您想改善测定体验，维护身体健康，建议您选择酶法生物样本H₂O₂含量检测试剂盒。
附录
       我司提供两种酶法生物样本H₂O₂含量检测试剂盒：（1）酶标仪，货号H₂O₂-1-W，规格100管/96样，售价700元/盒；（2）分光光度计，货号H₂O₂-2-W，规格50管/48样，售价360元/盒。
       检索发现Sigma-Aldrich同类试剂盒：货号MAK165，规格250管，售价7091元/盒。
       换算成单管价格：我司为7元/管，Sigma-Aldrich为28元/管。