可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进

发布日期：2025-03-18 11:28 浏览次数： 107 作者：admin

       只有测定数据可靠、真实和可用，才能据此撰写和发表研究论文，并且发表后不会被迫撤回。只有样本合格、指标合理、测定方法合适、测定用品合格和测定操作规范到位，才能保证测定数据可靠、真实和可用。此前我们介绍了“用户主动、及时和全面咨询的重要性”：（1）准备合格的样本，（3）选择合理的指标，（3）推荐每个指标的合适测定方法，（4）选择最适合自己的测定方式，（5）科学、合理地节省测定费用。本文介绍“可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进”是“测定数据可靠、真实和可用”的最后保障。
1 实例
1.1 试剂盒方式
       试剂盒方式出现可疑测定结果的可能原因：（1）试剂盒不合格，（2）样本不合格，（3）自备测定用品不合格，（4）测定操作不规范到位。
       实例1：2025年1月南京土壤所H老师使用我司土壤酸性磷酸酶活性试剂盒测定土壤样本该酶活性，反映技术重复性和样本重复性都很差，CV值分别>20%和>30%。我司与H老师共同进行了验证、原因查找和针对性改进，发现H老师测定操作不规范到位：（1）技术重复性差是因为(a)反应温度未严格控制在25^oC中，(b)反应时间未严格控制在30分钟；（2）样本重复性差是因为土壤样本未过筛而导致取样缺乏代表性和重复性。经过针对性改进，H老师重新测定后拿到了满意的测定数据。
       实例2：2023年7月 东北师范大学G老师反映使用我司全磷含量试剂盒测定样本，测定值严重偏高。我司与G老师一起进行了验证、原因查找和针对性改进，发现是因为G老师配制工作液的用水被含磷化合物污染。更换用水后，G老师重新测定后拿到了满意的测定数据。
提醒1
       试剂盒方式出现可疑测定结果的可能原因包括：（1）试剂盒不合格，（2）用户的样本不合格，（3）用户自备的测定用品不合格，（4）用户的测定操作不规范到位。其中，最常见的原因是用户的测定操作不规范到位。
提醒2
       试剂盒方式适合于：（1）有靠谱的生化测定公司提供该指标的生化试剂盒，（2）用户的生化测定操作规范到位，仅仅做过生化课程实验是不行的，尤其是硕士研究生，（3）用户具备合格的该试剂盒说明书列明的自备测定用品，（4）用户具备较多的生化测定时间。
提醒3
       试剂盒用户：（1）在准备样本前就主动咨询生化测定公司，以保证样本合格、指标合理、测定方法合适和生化测定公司靠谱；（2）在生化测定公司指导下，严格按照试剂盒说明书进行预测定，（3）主动、及时、如实和全面反映预测定结果、测定操作情况和可能的疑问，尤其是原始测定数据；（4）在生化测定公司确认预测定结果没有疑问后，再开始正式测定，以保证正式测定顺利进行，（5）与生化测定公司一起分析测定数据的可靠性、真实性和可用性，必要时进行可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进。
1.2 代测方式
       实例1：2024年3月华南农业大学L老师委托我司代测样本类黄酮含量，我司代测人员反映测定值重复性很差。我司技术人员进行了验证、原因查找和针对性改进，发现是因为显色后酶标板测定孔表面有一层油状膜（干扰吸光度）。经过脱脂处理后，测定值重复性恢复正常。
       实例2：2024年2月西北农林科技大学L老师委托我司测定叶片样本H₂O₂和MDA含量以及SOD、POD、CAT和APX酶活性，我司代测人员发现只有POD酶活性的测定值非常低，其它指标的测定值都正常。我司技术人员依次对试剂盒质量、其它测定用品和测定操作进行了验证，未发现问题。增加样本量，延长反应时间，添加POD酶（内标法），证实用户样本的POD酶活性确实非常低。鉴于POD普遍存在于植物样本中，我司建议L老师如果感兴趣可以进一步探究该样本中是否存在POD活性的抑制物，可能有新发现。L老师认可了我司验证结果，并且成功发表了SCI论文。
提醒4
       代测方式出现可疑测定结果的可能原因：（1）不合格，（2）样本特殊，（3）代测质量差，包括测定方法不合适、测定用品不合格和测定操作不规范到位。其中，最常见的原因是样本不合格。
提醒5
       代测方式适合于所有课题组，尤其是生化测定条件差的课题组，例如缺乏生化测定经验、时间或者用品。
       代测方式的优势：（1）对用户自身的生化测定条件没有要求，（2）测定成功率最高，（3）用户自身的测定工作量最小，只需要准备合格的样本和选择合理的指标；（4）测定费用≈试剂盒方式≈传统方式，可以把测定费用科学、合理地控制在现有课题经费范围内。
提醒6
      代测用户：（1）在准备样本前就主动咨询生化测定公司，以保证样本合格、指标合理、测定方法合适和生化测定公司靠谱；（2）及时、认真分析生化测定公司提供的免费预测定结果，尤其是技术重复性和样本重复性；（3）如果对免费预测定结果满意，则及时签订正式代测合同，以开始正式测定；（4）与生化测定公司一起分析测定数据的可靠性、真实性和可用性，必要时进行可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进。
2 可疑测定结果的类型和可能原因
2.1 可疑测定结果的类型
       包括：（1）测定值的重复性差，（2）测定值严重偏离文献报道，（3）某个指标的变化趋势不符合预期，（4）某个指标的测定值组内和（或）组间差异不显著，（5）难以解释不同指标的变化趋势，（6）难以得出明确、可靠的研究结论。
2.2 同一类可疑测定结果的原因可能不同
       例如，测定值重复性差的可能原因：（1）样本重复性差，（2）技术重复性差。技术重复性差的可能原因：（1）测定方法，（2）测定用品，（3）测定操作。测定操作重复性差的可能原因：（1）测定取样缺乏代表性，不能代表该份重复样本的整体状况；（2）样本称量不准确；（3）提取、分离不充分，或者不同样本的提取程度不一致，（4）加液体积不精确，（5）反应条件，尤其是温度和时间控制不严格一致；（6）加液完毕到开始测量的时间控制不严格一致等。
       又如某个指标的测定值组间差异不显著的可能原因：（1）样本不合格，（2）测定方法不合理，（3）测定用品不合格，（4）测定操作不规范到位，（5）该指标在所研究生物学现象中不起重要作用。其中，样本不合格的可能原因：（1）质不可靠，（2）数不合理，（3）样本混淆，（4）样本变质。其中，样本质不可靠的可能原因：（1）遗传背景不清楚，或者遗传操作不成功；（2）取样缺乏典型性、代表性和重复性。
       只有找出真正的原因，才能进行针对性改进。
3 严谨的态度和丰富的生化测定经验
       高效完成生化可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进，需要：（1）用户、生化测定公司和经销商严谨的态度，（2）生化测定公司丰富的生化测定经验。
3.1 严谨的态度
       充分认识到“可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进”是“测定数据可靠、真实和可用的最后保障”。否则可能造成极其严重的后果：（1）用户被造假，导师名声扫地，研究生被剥夺学位；（2）生化测定公司被用户和经销商抵制，甚至破产倒闭；（3）经销商被本地用户抵制，无法继续在本地本行业立足。
       严谨的态度：（1）用户高度重视，（2）生化测定公司全力以赴，（3）经销商积极督促。
3.2 生化测定公司丰富的生化测定经验
       由于可疑生化测定结果的类型多样，并且每一类型的可疑生化测定结果的可能原因多种，所以只有凭借生化测定公司丰富的生化测定经验，才能高效完成可疑生化测定结果的验证、原因查找和针对性改进，从而保证生化测定数据可靠、真实和可用。
       生化测定公司丰富的生化测定经验：（1）系列成套的生化测定方法的研发、试剂盒生产和代测而积累的丰富经验，（2）长期用户咨询工作而积累的丰富经验，（3）长期进行可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进而积累的丰富经验。
备注1 用户成功了，生化测定公司及其经销商才能成功
       生化试剂盒和代测本质上就是借助于生化测定公司的专业能力，包括丰富的生化测定经验，优秀的生化测定能力，高效的可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进，迅速提升课题组自身的科研竞争力，从而在激烈的同行竞争中脱颖而出，实现课题-论文的良性循环，不仅成功申请到新课题，而且吸引到优质生源。
       只有用户实现了课题-论文的良性循环，才能愿意并且有经费持续向生化测定公司及其经销商购买生化试剂盒和代测，生化测定公司及其经销商才能可持续多赚钱。
       因此，用户、生化测定公司和经销商的共同目标：轻松、及时拿到可靠、真实和可用的生化测定数据，据此发表更多、更高水平的研究论文。
备注2 做一个靠谱的用户、生化测定公司或者经销商
       只有用户、生化测定公司和经销商都靠谱，才能真正用好生化试剂盒和代测，从而轻松、及时拿到可靠、真实和可用的生化测定数据。
       用户靠谱：（1）主动、及时咨询生化测定公司，从而准备合格的样本、选择合理的测定指标和选择适合的测定方式，并且判断该公司是否靠谱，提高测定成功率，科学、合理地节省测定费用和时间；（2）及时、如实和全面沟通，尤其是预测定结果，正式测定结果，可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进，从而保证正式测定数据可靠、真实和可用；（3）如实标注和及时报销，只有在论文中如实标注测定方式和测定公司，才能有效保护用户自身，避免被造假，只有及时报销，才能与靠谱的生化测定公司及其经销商长期合作，避免各种不必要的麻烦。在选择生化测定公司和经销商时，用户不能随意、轻信和贪图便宜。
       生化测定公司靠谱：（1）科学、合理的咨询，如何准备合格的样本，如何选择合理的指标，推荐每个指标的合适的测定方法，推荐适合的测定方式；（2）高质量、系列成套的生化试剂盒和代测；（3）及时、有效和全面的售后支持，如何根据预测定结果判断样本、测定方法、测定用品和测定操作是否存在问题，如何全面分析测定数据的可靠性、真实性和可用性，高效完成可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进；生化测定公司才能真正帮助用户轻松、及时拿到可靠、真实和可用的测定数据。避免虚假宣传、故意误导或者敷衍塞责。
       经销商靠谱：（1）建立并维护自身的信誉，尤其是在本地用户中的口碑，从而为代理品牌背书，提高代理品牌在本地用户中的接受度；（2）选择靠谱的生化测定公司，保证生化试剂盒和代测的质量；（3）努力把靠谱的生化试剂盒和代测推荐给代理区域有需求的靠谱用户，才能赢得本地用户的信赖，稳步提升代理品牌在本地的销售额。避免把不靠谱的产品和服务推荐给不靠谱的用户。
       总而言之，用户、生化测定公司和经销商判断“自己行为是否正确”的核心标准——“是否有利于轻松、及时拿到可靠、真实和可用的生化测定数据”。