课题主持人在生化测定上的选择

发布日期：2025-08-15 12:53 浏览次数： 作者：admin

       《道德经》：上士闻道，勤而习之；中士闻道，若存若亡；下士闻道，大笑之，不笑不足以为道。
       此前，我们分享了《研究生在生化测定上的选择》。本文继续分享《课题主持人在生化测定上的选择》，供参考。
       只有明确了生化测定的目标，厘清了课题组自身生化测定条件，课题主持人才能在生化测定上做出科学、合理的选择：（1）选择哪种生化测定方式，（2）与哪家公司合作，（3）是否亲自审核订单，（4）是否亲自审核预测定和正式测定的数据，（5）是否督促研究生及时报销和如实标注。
1 明确课题主持人在生化测定上的目标
       只有实现课题-论文的良性循环，课题主持人才能提升学术地位，升职加薪。
       只有发表更多、更高档次的论文，课题主持人才能优质结题，从而在与其他课题组的竞争中脱颖而出，成功申请到新课题，实现课题-论文的良性循环。
       因此，课题主持人在生化测定上的目标依次为：（1）测定成功率高，成功拿到可靠、真实和可用的生化测定数据，据此才能撰写和发表论文；（2）测定效率高，及时拿到可靠、真实和可用的生化测定数据，据此才能发表更多、更高档次的论文；（3）测定费用科学、合理，轻松拿到可靠、真实和可用的生化测定数据，测定费用在现有课题经费范围内，至少不浪费。
2 厘清课题组自身生化测定条件
       生化测定条件包括：（1）测定人的生化测定经验，（2）测定人的生化测定时间，（3）测定用品，（4）测定人的态度。
       通常，课题组的测定人是研究生。因此，研究生的经验、时间和态度就成为课题组最关键的自身生化测定条件。
2.1 生化测定经验是否丰富
       只有测定人具备丰富的生化测定经验，才能依次排除“指标不合理”、“样本不合格”、“测定方法不合适”和“测定操作不规范、到位”4种风险，从而提高生化测定成功率。
       只有通过长期的生化测定实践，测定人才能积累丰富的生化测定经验。
       如果只是做过课程生化实验，例如研究生，尤其是硕士研究生，那么不能称为生化测定经验丰富，甚至难以保证生化测定操作的规范、到位。
       如果课题主持人的研究方向非生化专业，那么同样缺乏生化测定经验。
2.2 生化测定时间是否充足
       生化测定时间是指测定人能够花在生化测定上的时间。只有具备充足的生化测定时间，才能完成全部指标的全部样本的测定。
       但是，课题有周期，研究生有学制。因此，只有提高生化测定效率，才能发表更多论文。
2.3 测定用品是否合格
       只有测定用品合格，生化测定才能顺利进行，并且测定数据真实、可用。
       合格的生化测定用品：（1）仪器设备，种类齐全、性能合格和质量稳定；（2）试剂，种类齐全、纯度合格和数量充足；（3）耗材，种类齐全、性能合格和数量充足。
       通常课题经费只能用来购买试剂和耗材，而不能购买仪器设备。
2.4 态度是否积极、严谨
       即使生化测定的经验丰富、时间充足和用品合格，也不能保证生化测定成功。
       必须加上测定人的态度积极、严谨，才能真正保证生化测定成功。
提醒1：如果测定人是研究生，尤其是硕士研究生，那么课题主持人务必关注其生化测定经验和态度，避免生化测定失败，尤其是测定数据不真实，被造假。
3 课题主持人的可能选择
3.1 选择哪种生化测定方式
       生化测定方式有3种：传统方式、试剂盒方式和代测方式。课题主持人必须根据生化测定的目标，结合自身生化测定条件，选择最适合的生化测定方式。
3.1.1 自身生化测定条件优秀
       自身生化测定条件优秀是指同时具备：（1）丰富的生化测定经验，（2）充足的生化测定时间，（3）合格的测定用品，尤其是仪器设备种类齐全、性能先进；（4）积极、严谨的测定态度。
       传统方式：（1）优点，测定费用最低；（2）缺点，测定效率最低。
       试剂盒方式：（1）优点，测定效率显著高于传统方式；（2）缺点，测定费用显著高于传统方式。
       代测方式：（1）优点，测定效率最高；（2）缺点，测定费用最高。
提醒2：对自身生化测定条件优秀的课题组而言，最重要的提高测定效率，才能发表更多、更高档次的论文，因此优先选择代测方式，其次是试剂盒方式（平衡了测定的效率和费用），尽可能不选择传统方式。
3.1.2 自身生化测定条件差
       自身生化测定条件差是指具备下列情况之一：（1）测定人缺乏丰富的生化测定经验，难以保证生化测定成功；或者（2）测定人缺乏足够的生化测定时间，不能完成全部指标的全部样本的测定；或者（3）实验室缺少合格的测定用品，尤其是仪器设备，测定不能正常进行；或者（4）测定人态度不积极、严谨，难以保证测定数据真实和提高测定效率。
       传统方式：没有优点，只有缺点。成功率最低，效率最低，测定费用居高不下，甚至测定不能进行。
       试剂盒方式：因为测定操作不规范、到位，所以测定反复，测定效率不高，但是测定费用同样很高；或者因为自备测定用品不合格，导致测定不能进行。
       代测方式：没有缺点，只有优点。因为对用户自身测定条件没有要求，所以成功率最高，效率最高，并且测定费用可以科学、合理地降低到现有经费范围内。
提醒3：对于自身生化测定条件差的课题组而言，不仅需要提高测定的成功率和效率，而且需要避免测定费用的浪费，才能发表更多、更高档次的论文，因此只能选择代测方式，不能选择试剂盒方式，更加不能选择传统方式。
3.2 与哪家公司合作
       选择代测方式或者试剂盒方式，合作公司是否靠谱才是生化测定能否成功的关键。
       靠谱的公司充分认识到：只有用户实现课题-论文的良性循环，公司才能可持续多赚钱。只有公司真正帮助用户轻松、及时拿到可靠、真实和可用的生化测定数据，用户才能据此发表更多、更高档次的论文，从而优质结题，在与其他课题组的竞争中脱颖而出，成功申请到新课题，实现课题-论文的良性循环。相应地，用户就愿意并且持续有经费继续购买公司的产品和服务，公司就能可持续多赚钱。
       基于上述认识，凭借丰富的生化测定经验、性能先进的测定平台和积极严谨的测定态度，靠谱的品牌商为用户提供：（1）科学、合理的咨询服务，提供“如何选择合理的指标”、“如何准备合格的样本”和“推荐每个指标的合适的测定方法”等建议，从而从源头上排除“指标不合理”、“样本不合格”和“测定方法不合适”3类风险，不仅提高了成功率，而且科学、合理地降低了测定费用；（2）高质量、系列成套的生化代测服务或生化试剂盒，全面满足不同研究主题的生化测定需要，尤其是生化代测服务，进一步排除了“测定用品不合格”和“测定操作不规范、到位”2类风险；（3）及时、有效和全面的售后服务，“根据预测定结果，尤其是样本重复性和技术重复性，判断样本、测定方法、测定用品和测定操作是否存在问题”、“全面分析测定数据的可靠性、真实性和可用性”和“高效完成可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进”等，从而真正保证测定数据可靠、真实和可用；（4）免费预测定，只有用户对免费预测定结果满意了，才签订正式代测合同；（5）试剂盒先用后付，如果因为试剂盒质量问题导致测定最终失败，用户不用付款。
       基于上述认识，靠谱的经销商：（1）与靠谱的品牌商签订长期代理合同，（2）只为有需求的用户推荐靠谱的品牌商的产品和服务，（3）以自身的信用为品牌商和用户提供担保，（4）提供及时的本地服务，（5）妥善处理品牌商、用户和经销商相互之间的可能矛盾，从而平衡三方利益。
       相反，如果合作公司不靠谱，那么：（1）轻则测定反复，浪费用户的时间、经费和样本，用户不能优质结题；（2）重则测定彻底失败，用户不能按时、顺利结题；（3）甚至拿到的测定数据不真实，用户被造假。
       鉴于研究生既缺乏科研经验，又缺乏社会经验，课题主持人务必亲自选择合作公司，以免因为公司不靠谱而不能实现自身在生化测定上的目标。
提醒4：（1）选择合作公司时切勿随意、轻信或贪便宜，尤其要警惕频繁促销的公司；（2）根据品牌商回复咨询问题的科学性、合理性和态度，尤其是“如何选择合理的指标”和“如何准备合格的样本”等问题，进一步判断该公司是否靠谱；（3）先合作一个小单子，根据其产品和服务的实际质量，最后判断该品牌商是否靠谱，最终决定是否与其长期合作。
3.3 是否亲自审核订单
       审核事项：（1）指标是否合理，（2）样本是否合格，（3）每个指标的测定方法是否合适，（4）测定费用是否在预算范围内，（5）提交免费预测定结果的日期，或者寄送生化试剂盒的日期，（6）是否符合所在单位的采购和报销政策。
鉴于研究生既缺乏科研经验，又不熟悉所在单位的采购和报销政策，还不知道经费情况，所以课题主持人务必亲自审核订单，确保订单顺利、按时完成，及时拿到可靠、真实和可用的生化测定数据，避免浪费测定费用，保证采购和报销顺利。
提醒5：订单可以由研究生去谈，但是课题主持人一定要亲自审核订单，确认无误后再批准该订单。
3.4 是否亲自审核预测定和正式测定的数据
3.4.1 审核预测定数据的可靠性和真实性
       根据预测定结果，尤其是样本重复性和技术重复性，可以判断样本、测定方法、测定用品和测定操作是否存在问题，从而决定是否进行正式测定，还是改进后再进行正式测定，从而保证正式测定数据可靠、真实。
       鉴于研究生既缺乏科研经验，又可能不够严谨，所以课题主持人务必亲自审核预测定结果，包括公司提供的免费预测定结果，或者研究生使用试剂盒测定的预测定结果，从而决定是否开始正式测定。
3.4.2 审核正式测定数据的可用性
       审核内容：（1）平均值是否严重偏离文献报道值，（2）变异系数是否过大或过小，（3）每个指标的测定值变化是否有规律，（4）测定值的组内和组间差异是否显著，（5）不同指标的测定值变化趋势是否矛盾，（6）根据现有指标的测定值能否得出明确、可靠的研究结论，尤其是找出关键物质和关键酶，（7）现有测定数据能否支撑起1篇论文，（8）现有测定数据是否符合预期，如果不符合，那么能否给出科学、合理的解释。
       鉴于研究生，尤其是硕士研究生，通常难以判断正式测定数据的可用性，所以课题主持人应该亲自审核正式测定数据的可用性。
提醒6：课题主持人应该亲自审核预测定和正式测定数据，如果测定数据可疑，那么要求公司和研究生及时进行验证、原因查找和针对性改进，从而决定是否进行正式测定，并保证正式测定数据的可靠性、真实性和可用性。
3.5 是否督促研究生及时报销和如实标注
3.5.1 督促研究生及时报销
       研究生不及时报销，通常都是因为疏忽或者等积累一批发票后再报销。
       如果研究生不能及时报销，那么可能带来一系列麻烦：（1）因为发票遗失，错过所在单位报销截止日期，采购和报销政策改变，而不能正常报销；（2）因为未报销，导致结题决算不能正常进行，研究生不能正常离校；（3）因为破坏课题主持人的信用，而影响进一步合作；（4）因为没有付款而丧失测定数据的所有权和使用权，而不能撰写和发表论文，或者论文被迫撤回。
       因此，如果代测或试剂盒质量本身不存在问题，那么课题主持人就应该督促研究生及时报销。
3.5.2 督促研究生如实标注
       作者在论文中如实标注测定方法、测定方式和公司名称，不仅是论文写作的规范要求，而且是对作者的保护。
       如果测定数据不真实，那么作者只要如实标注了测定方式和测定公司名称，就属于被造假，而不是主动造假。被造假的处罚程度要远远轻于主动造假。
提醒7：课题主持人应该督促研究生及时报销和如实标注，以维护自身的信用，并且保护自身。
附录：名词解释
1 生化测定成功率
       通过生化测定，成功拿到可靠、真实和可用的生化测定数据，并据此撰写和发表论文的概率。
       风险越多、越高，则生化测定成功率越低。
       传统方式有5类风险：（1）指标不合理，（2）样本不合格，（3）测定方法不合适，（4）测定用品不合格，（5）测定操作不规范、到位。
       试剂盒方式有3类风险：（1）自备测定用品不合格，（2）测定操作不规范、到位，（3）合作公司不靠谱。
       通常生化测定成功率是传统方式<试剂盒方式<代测方式，不靠谱的公司<靠谱的公司。
2 生化测定效率
       为了撰写和发表1篇论文，课题组花在生化测定上的实际时间长短；生化测定时间越短，则生化测定效率越高，从而在课题周期或者读研期间能够撰写和发表的论文数就越多。
       生化测定效率与成功率成正比，与指标数、样本数和工作项数成反比。
       成功率越低，则测定反复的概率就越高；测定每反复一次，则测定所需的时间、经费和样本量就翻一番。因此，成功率越低，则生化测定效率就越低。
       指标数越多，样本数越多，则生化测定效率就越低。
       工作项数越多，则测定人花在生化测定上的时间就越多，相应地生化测定效率就越低。
       传统方式课题组负责8项工作：（1）选择合理的指标，（2）准备合格的样本，（3）逐一建立每个指标的合适的测定方法，（4）落实合格的全部测定用品，（5）预测定，（6）正式测定，（7）分析测定数据的可靠性、真实性和可用性，（8）可疑测定结果的验证、原因查找和针对性改进。
       试剂盒方式课题组负责5项工作：（1）选择合理的指标，公司可以提供建议；（2）准备合格的样本，公司可以提供建议；（3）落实合格的自备测定用品，仪器设备、耗材和极个别不允许快递的试剂；（4）预测定，公司可以提供技术支持；（5）正式测定，公司可以提供技术支持。
       代测方式课题组负责2项工作：（1）选择合理的指标，公司可以提供建议；（2）准备合格的样本，公司可以提供建议。
       生化测定效率是传统方式<试剂盒方式<代测方式，不靠谱的公司<靠谱的公司。
3 生化测定单价
       测定一份样本的一种生化指标所需的经费。
       测定单价是传统方式<试剂盒方式<代测方式，促销<不促销，不靠谱的公司<靠谱的公司。
4 生化测定费用
       为了撰写和发表1篇论文，课题组花在生化测定上的实际经费。
       测定费用=测定单价×指标数×样本数÷成功率。
       对于自身生化测定条件优秀，尤其是测定人生化测定经验丰富的课题组，测定费用是传统方式<试剂盒方式<代测方式，但是测定效率也是传统方式<试剂盒方式<代测方式。
       对于自身生化测定条件差，尤其是测定人缺乏生化测定经验，甚至难以保证生化测定操作规范、到位的课题组：（1）传统方式的测定费用居高不下，尽管测定单价最低，但是测定成功率最低，指标数不合理，样本数不合理；（2）试剂盒方式的测定费用同样很高，测定单价>传统方式，测定操作不规范、到位导致测定成功率低；（3）代测方式的测定费用反而最低，尽管测定单价最高，但是测定成功率最高，指标数合理，样本数合理。更加重要的是测定效率是传统方式<试剂盒方式<代测方式。
5 生化测定数据可靠
       生化测定数据可靠地反映了测定指标与所研究生物学现象之间的关系，取决于样本的质是否可靠。
6 生化测定数据真实
       生化测定数据反映了所测定样本中该指标的真实状况，取决于测定方法是否合适、测定用品是否合格和测定操作是否规范到位。
7 生化测定数据可用
       根据现有生化测定数据，既能够得出明确、可靠的研究结论，又能够支撑起1篇论文，取决于指标是否合理、样本是否合格、测定方法是否合适、测定用品是否合格和测定操作是否规范到位。
8 指标合理
（1）指标不遗漏，据此能够得出明确、可靠的研究结论，尤其是决定该生物学现象的关键物质和关键酶；
（2）指标不分散，既能撰写和发表论文，又不浪费测定的时间、经费和样本；
（3）指标数不偏少，以免不能支撑起1篇论文；
（4）指标数不偏多，以免撰写和发表论文时有些指标用不上，浪费了时间、经费和样本。
       通常根据研究主题、样本类型和拟撰写论文的类型/数量，选择合理的指标。
9 样本合格
（1）质可靠，
（2）数合理，
（3）量充足，
（4）未混淆、变质或遗失。
       只有样本合格，才能进行正式测定。
       保证样本合格的措施：（1）在准备样本前就主动咨询靠谱的公司，（2）在下单前与靠谱的公司一起核对已取样本是否合格，（3）根据预测定结果最终判断样本是否合格。
10 样本质可靠
（1）遗传背景清楚无误，物种、品种、细胞系或细胞株无误，或者遗传操作成功；
（2）取样兼备典型性、代表性和重复性；
（3）在取样时，以及在运输、保存、称量和提取过程中，样本中拟测定指标的物质含量或者酶活性未发生显著改变。
       只有样本的质可靠，生化测定数据才能可靠。
11 取样典型性
       与对照组相比，处理组呈现了典型的所研究生物学现象，即处理组和对照组所取样本在所研究生物学现象上差异显著。
       取样缺乏典型性是生化测定指标组间差异不显著的主要原因之一。
12 取样代表性
（1）在准备样本时的取样，能够代表所在处理组合的整体状况；
（2）在测定时取样，即取出某种样本的一部分，用于称量和提取，这部分能够代表该样本的整体状况，尤其是当样本存在空间异质性时，例如动植物的器官或者土壤。
       取样缺乏代表性是生化测定指标变化无规律的主要原因之一。
13 取样重复性
       重复样本的生物学差异要尽可能小。
       取样缺乏重复性是变异系数过大的主要原因之一。
14 样本数合理
       样本数是指样本的总份数，取决于处理组合数、取样时间点数和重复样本数。
       样本数合理：（1）不过少，通常处理组合数≥2种，取样时间点数≥5个，重复样本数≥3份，样本数≥27份，否则难以保证生化测定数据可用；（2）不过多，过多则有些样本的测定数据在撰写论文时用不上，浪费了测定的时间和经费。
15 样本量充足
       样本量是指每份样本的克数（固态样本）、毫升数（液态或者气态样本）或者百万细胞数（单细胞样本）。
       样本量充足是指每份样本的量能够充分满足后续生化测定的需要。样本量取决于指标数、测定方法的检测限和测定的成功率。
       原则是“能取尽取，宁可备而不用，不可用而不备”。珍稀样本可咨询公司。
16 样本不混淆
（1）避免标签模糊或者脱落，
（2）避免随机编号，随机编号虽然可以避免测定人的主观对测定数据的影响，但是转换可能导致样本混淆。
       一旦有2份以上样本无法区分，则整批样本都只能报废，无法用于生化测定。
17 样本不变质
       在取样时，在样本运输和保存过程中，在样本称量和提取过程中，以及样本粗提液在反应前，拟测定指标的含量或者活性未发生显著改变。
       主要影响因素包括温度、湿度和时间。
       变质的样本不再能够用于生化测定。
18 样本不遗失
（1）样本备份，同样的样本准备2~3份，并分开存放；
（2）选择可靠的运输方式，或运输公司；
（3）避免被意外清理，尤其是被同实验室的其他人清理掉。
       样本遗失可能导致生化测定无法完成。
19 测定方法合适
（1）测定对象的专一性强，
（2）测定结果重复性好，
（3）测定操作简便或者自动化程度高，
（4）实验室具备该方法所需的测定用品，尤其是仪器设备，
（5）预测定结果表明该方法适合所测定的样本。
       测定方法不合适是测定数据不真实、可用的主要原因之一。
20 测定用品合格
       仪器设备、试剂和耗材的种类齐全、质量合格和数量充足。
       测定用品不合格是测定不能正常进行，测定数据不真实、可用的主要原因之一。
21 测定操作
（1）溶液配制，
（2）样本称量，
（3）提取分离，
（4）加样加液，
（5）反应，
（6）测量。
       测定操作不规范、到位是测定失败，测定数据不真实、可用的主要原因之一。
22 测定操作不规范
       未严格按照说明书的操作步骤进行操作。
23 测定操作不到位
       该测定操作未能实现其目的。例如实际反应温度并非说明书指定的温度。
24 变异系数
       变异系数=标准误÷平均值。变异系数过大，误判为差异不显著；变异系数过小，误判为差异显著。
       变异系数取决于技术重复性和样本重复性。
25 技术重复性
       取决于测定方法、测定用品和测定操作。尤其是测定操作不规范、到位。
       取同一份样本，分别称量、提取和测定3次，计算变异系数1=标准误÷平均值。变异系数1越大，则技术重复性越差。
       只有技术重复性够好，才能开始正式测定。
26 样本重复性
       反映了取样的重复性。
       取3份重复样本，每份重复样本各进行一次称量、提取和测定，计算变异系数2=标准误÷平均值，变异系数2－变异系数1的差值越大，则样本重复性越差。
       通常环境控制越严格，则样本重复性越好。标准误与自由度成反比，因此增加重复样本数可以显著降低标准误，从而获得合适的变异系数：（1）培养的单细胞样本重复数为3份，（2）室内培养的动植物样本重复数≥3份，（3）大田生物样本重复数≥5份，（4）野生生物样本，土壤样本，水体样本，重复数更多，例如7~10份。