新闻通知

新品上架 ▏乙酰乳酸合成酶试剂盒

发布日期:2022-09-06 11:19 浏览次数: 作者:admin

乙酰乳酸合成酶概述

       乙酰乳酸合成酶(acetolactate synthase,ALS)也称为乙酰羟酸合成酶(acetohydroxyacid synthase,AHAS),是植物和微生物体内合成支链氨基酸亮氨酸、缬氨酸和异亮氨酸的关键酶。ALS催化一分子2-丁酮酸和一分子丙酮酸形成2-乙酰基-2-羟基丁酸或催化2分子丙酮酸形成2-乙酰乳酸,其中2-乙酰基-2-羟基丁酸是合成异亮氨酸的前体化合物,2-乙酰乳酸是合成缬氨酸和亮氨酸的前体化合物。

 
(图1  ALS及其抑制剂作用机理)
 

       乙酰乳酸合成酶是磺酰脲类、咪唑啉酮类和三唑并嘧啶类等除草剂的靶标酶,ALS抑制剂类除草剂通过抑制植物体内ALS活性,导致支链氨基酸合成受阻,进而影响蛋白质合成,导致细胞无法完成分裂,停止生长,最终死亡。还有研究表明,ALS有作为除菌化合物作用位点的潜力。此外,ALS催化2分子丙酮酸生成的2-乙酰乳酸,经过非酶催化产生双乙酰,相比传统化学合成生成双乙酰,更加安全环保。

 
(图2 ALS的空间结构与结合位点)
 


乙酰乳酸合成酶测定

       乙酰乳酸合成酶测定,主要是依靠ALS催化丙酮酸产生乙酰乳酸,乙酰乳酸脱羧后产生乙偶姻,乙偶姻在碱性环境下与肌酸和α-萘酚反应产生红色物质,在525nm处有吸光度,通过测定乙偶姻生成量来计算ALS活性。但是实际操作中,需要对酶蛋白进行繁琐的纯化,影响了测定的效率。
       在此原理基础上,科铭进行了一系列的优化,国内首次研发了商品试剂盒。在将干扰降至最低的前提下,简化了蛋白纯化的步骤,加快了测定速度,提高了通量,使实验更加高效。


科铭ALS试剂盒的优势

1. 节省测定时间,加快测定速度,通量大
       科铭ALS活性试剂盒简化了步骤,去除了繁琐的洗脱透析等步骤,全程仅需90分钟。微量法一次性可以测定48管样品,通量大。
2. 测定准确,受干扰小
       在尽量提高测定效率的同时,通过对实验体系的优化,排除了体系内的干扰,确保了实验的准确性。
3. 灵敏度高,线性范围广

 

下一篇:没有了